分散酶II可應用于組織的解離

分散酶II能快速有效且溫和的破壞組織細胞外基質(zhì)釋放單細胞培養物(原代細胞培養物)或收集已培養的細胞將其轉移到新的培養基質(zhì)上(傳代培養)。

分散酶II可應用于組織的解離，具體步驟如下：

1、用無(wú)菌的小刀或者剪刀將組織剪成合適大小的組織塊。

2、用無(wú)菌PBS清洗組織塊。

3、向上述組織塊中加入Dispase II溶液( 工作濃度為0.6-24U/ml)，并確保組織塊全部浸沒(méi)于Dispase溶液中。

4、37°C孵育，孵育過(guò)程緩慢攪拌直至組織塊全部解離。（若*一次使用該酶，可通過(guò)細胞計數來(lái)確定需要的總孵育時(shí)間。一般對于較難解離組織，1h即可達到分離目的，但更長(cháng)時(shí)間(如數小時(shí))的孵育也不會(huì )明顯影響細胞活性。）

5、如有需要，可將上述消化產(chǎn)物通過(guò)無(wú)菌不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾，以分開(kāi)單細胞與殘留的組織塊?；蛘叽髩K組織沉淀后輕輕倒出上層細胞，若是需要，換用新鮮dispase溶液以進(jìn)一步解離殘留組織。

6、離心沉淀細胞，倒掉酶溶液;

7、用培養基重懸細胞沉淀，并于常規條件下培養細胞。